Please use this identifier to cite or link to this item:
Authors: Долматова, Л. С.
Уланова, О. А.
Тимченко, Н. Ф.
Other Titles: Markers of functional state of the two types of phagocytes of the holothurian Eupentacta fraudatrix treated with a thermostable toxin of Yersinia pseudotuberculosis
Keywords: голотурии;Eupentacta fraudatrix;фагоциты;интерлейкин-1α-подобные вещества;апоптоз;бактериальный токсин;активные формы кислорода
Issue Date: 2016
Publisher: Севастополь: ЭКОСИ-Гидрофизика
Language (ISO): Russian
Volume number: 1
Pages: 413-415
Abstract: Целью исследования явилось изучение показателей ответа фагоцитов Ф1 и Ф2 голотурии Eupentacta fraudatrix на воздействие термостабильного токсина Yersinia pseudotuberculosis (ТсТYp) in vitro и in vivo. Фракции фагоцитов голотурии получали центрифугированием в градиенте плотности фиколл-верографина. Клетки инкубировали с ТсТYp в концентрациях 0,2 и 0,5 мкг/мл при 22°С в течение 48 ч. В серии опытов in vivo использовали ТсТYp в дозах 0,5 и 1,25 мкг/г. Фагоциты выделяли через 5 ч. Уровень нитросинего тетразолия (НСТ) измеряли колориметрическим методом. Апоптоз определяли, используя методы окраски Hoechst 33342 и элекрофореза ДНК в агарозном геле. Жизнеспособность клеток оценивали тестом исключения трипанового синего. Измерение уровня интерлейкин-1α-подобных веществ (ИЛ-1α-ПВ) в клетках проводили методом ИФА. Выявлена разная направленность изменений исследованных показателей в двух типах фагоцитов голотурии E. fraudatrix в ответ на воздействие ТсТYp. Предполагается различная роль отдельных типов фагоцитов в антибактериальной защите.
Description: This work aims at the comparable study on the markers of response of two phagocyte fractions (P1 and P2) of the holothurian Eupentacta fraudatrix to the treatment with a thermostable toxin of bacteria Yersinia pseudotuberculosis in vitro and in vivo. The phagocyte fractions were isolated using a ficoll-verographine discontinous gradient. The cells were incubated with ТsТYp (0.2 and 0.5 μg/ml) at 22°C for 48 h. In the series of in vivo experiments ТsТYp was used at the doses of 0.5 и 1.25 μg/ml. Phagocytes were isolated in 5 h. The nitroblue tetrazolium level was measured by the colorimetric method. Apoptosis was evaluated with using both methods of DNA agarose gel electrophoresis and Hoechst 33342 staining. Cell viability was estimated with a trypan blue exclusion test. The level of IL-1α-like substances was determined using kit for immune enzyme analysis. The results obtained indicate that ТsТYp induced differently directed changes in the markers studied in the two types of phagocytes in the holothurian E. fraudatrix. It suggests different roles of those two types in antibacterial defense.
Appears in Collections:Морские биологические исследования: достижения и перспективы. Т. 1 / Marine biological research: achievements and perspectives. Vol. 1

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
413-415.pdf280,71 kBAdobe PDFThumbnail

Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.